实验参数
最低浓度对齐法：以未排除样品中的最低浓度为基准，其他样品加 RIPA 对齐后再加入 Loading buffer。
使用参数
点击“保存到浏览器”后，只要不清空浏览器缓存，下次打开会自动沿用保存的参数；点击“保存参数 TXT”后，可在后续使用时通过“上传参数”沿用之前的标曲等设置。默认使用新赛美 BCA 试剂盒标曲。
未读取浏览器参数
BCA稀释倍数
10.00
体系总体积 / 蛋白原液体积
最低浓度样本
等待OD
仅从未排除样品中选取
最低原液浓度
等待 OD
以该浓度作为统一基准
对齐后终浓度
等待 OD
最低原液浓度 × (X - 1) / X
样品状态
0 / 0
纳入 / 排除
| 蛋白编号 | 样品 OD | 吸取上清体积 μL |
真实浓度 μg/μL |
Loading buffer μL |
RIPA μL |
稀释后终浓度 μg/μL |
状态 | 操作 |
|---|
计算方法
系统以未排除样品的最低真实浓度作为统一基准，计算每个样品所需的 RIPA 与 Loading buffer。
浓度换算
真实浓度 = ((OD - b) / m) × (BCA体系总体积 / BCA中蛋白原液体积)
最低浓度对齐法
最低浓度 = 所有未排除且有效样品真实浓度中的最小值
预混总体积 = 吸取上清体积 × 当前样品浓度 / 最低浓度
RIPA = 预混总体积 - 吸取上清体积
Loading buffer = 预混总体积 / (Loading buffer倍数 - 1)
稀释后终浓度 = 最低浓度 × (Loading buffer倍数 - 1) / Loading buffer倍数
策略与提醒
排除低浓度样品
排除样品不参与最低浓度基准，且不补 RIPA，直接按自身上清体积加入 Loading buffer。系统会计算其实际终浓度，并在状态中提示 WB 等量蛋白所需的相对上样体积倍数。所有 OD 均应处于所用标曲的线性范围内。