BCA蛋白浓度归一化计算器

等待输入

实验参数

最低浓度对齐法：以未排除样品中的最低浓度为基准，其他样品加 RIPA 对齐后再加入 Loading buffer。

使用参数

点击“保存到浏览器”后，在同一浏览器、同一页面来源再次打开且未清除站点数据或本地存储时，会自动沿用保存的实验参数；点击“保存参数 TXT”后，可在后续使用时通过“上传参数”恢复之前的标曲等设置。两种方式均仅保存实验参数，不包含样品表和计算结果。默认使用新赛美 BCA 试剂盒标曲。

未读取浏览器参数

BCA稀释倍数 10.00 体系总体积 / 蛋白原液体积
最低浓度样本 等待OD 仅从未排除样品中选取
最低原液浓度 等待 OD 以该浓度作为统一基准
对齐后终浓度 等待 OD 最低原液浓度 × (X - 1) / X
样品状态 0 / 0 纳入 / 排除

样品表

输入编号、OD 和吸取上清体积；OD 与上清体积列按回车均可跳到下一行。

BCA蛋白浓度归一化样品计算结果
蛋白编号 样品 OD 吸取上清体积
μL		 真实浓度
μg/μL		 Loading buffer
μL		 RIPA
μL		 稀释后终浓度
μg/μL		 状态 操作
使用方法、计算原理与反馈入口 说明

使用说明

  1. 首先在【实验参数】部分设置标准曲线、BCA 孔内样本总体积、BCA 中蛋白原液体积与 Loading buffer 倍数；系统会根据两项 BCA 体积自动计算检测稀释倍数。
  2. 之后在【样品表】部分填写样本 OD 与对应样本的吸取上清体积。按 Enter 键可自动跳转到下一行；新行默认沿用上一样本的上清体积，也可先留空、最后统一填写。系统会从未排除且 OD、上清体积均有效的样本中选取最低真实浓度作为基准，为其余纳入样本计算需补加的 RIPA 体积，并为所有有效样本计算 Loading buffer 体积。组织样本可重复进行多次 BCA 检测并多次调整浓度，以提高准确度。
  3. 如果某一个或某几个样本浓度特别低，为防止其影响其他高浓度样本，可将其设置为排除样本。排除后，该样本不参与最低浓度基准，只会直接加入 Loading buffer，并计算加入 Loading buffer 后的终浓度；后续 WB 上样可根据状态提示提高上样量。
  4. 默认 BCA 曲线来自新赛美（NCM）WB6501 BCA 蛋白定量试剂盒，采用 BSA 浓度梯度法，在 37℃ 孵育 30 min、每个标准点设置 3 个复孔的检测条件下获得。如需自行设置曲线，可选择“自定义标曲”并填写斜率、截距，然后点击“保存参数 TXT”和“保存到浏览器”。“保存到浏览器”可在下次打开时沿用上一次参数；若清除该网站的浏览器站点数据或本地存储，保存内容会丢失。建议同时保存 TXT，参数丢失后可点击“上传参数”恢复。两种方式均仅保存实验参数，不包含样品表和计算结果。
  5. 其他功能需求、意见、建议或 Bug 反馈，可通过下方二维码联系。

计算方法

系统以未排除且输入有效样品中的最低真实浓度作为统一基准，为其余纳入样品计算 RIPA，并为所有有效样品计算 Loading buffer。

浓度换算 真实浓度 = ((OD - b) / m) × (BCA体系总体积 / BCA中蛋白原液体积)
最低浓度对齐法 最低浓度 = 所有未排除且有效样品真实浓度中的最小值 预混总体积 = 吸取上清体积 × 当前样品浓度 / 最低浓度 RIPA = 预混总体积 - 吸取上清体积 Loading buffer = 预混总体积 / (Loading buffer倍数 - 1) 稀释后终浓度 = 最低浓度 × (Loading buffer倍数 - 1) / Loading buffer倍数

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